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一步法RT-PCR反转试剂盒

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产品名称: 一步法RT-PCR反转试剂盒
产品型号: 20次 50次 100次
产品品牌: Biomiga
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简单介绍

编号: RT0213-01 规格: 20 次 编号: RT0213-02 规格: 50 次 编号: RT0213-03 规格: 100次


一步法RT-PCR反转试剂盒  的详细介绍

说明 :

产品简介
 
一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系**用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液,能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间,该试剂盒为50 μl的反应体系。
 
试剂盒组分

产 品
RT0213-00
RT0213-01
RT0213-02
RT0213-03
Reactions
5
20
50
100
Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix
5 μL
20 μL
50 μL
100 μL
2× Reaction mix (optimized bμffer contains dNTP and Mg2+)
125 μL
500 μL
1.25 mL
2×1.25 mL
5 mM Magnesiμm Sμlfate
125 μL
500 μL
1.0 mL
2×1.0 mL
dd H2O
150 μL
600 μL
1.5 mL
2×1.5 mL

保存条件
 
该试剂盒-20°C保存,在此条件下可保存二年。
 
产品特点
 
方便的一管式设置
*佳的RT-PCR缓冲液及高效性
高度敏感性、特异性及重复性
 
推荐RT-PCR反应体系
 
建议用如下组成配制RT-PCR反应起始液:
组分
50 μl 体系
终浓度
2× Reaction mix
25 μL
Enzyme mix
1.0 μL
 
Forward Primer (10 μM)
1.0 μL
200 nM
Reverse Primer (10 μM)
1.0 μL
200 nM
RNA template
× μL
Variable (0.01pg - 2μg)
Final Volμme (μL)
50 μL
用dd H2O补足50 μL体系
*如有必要,镁盐浓度可进一步优化。
1.将反应溶液在冰上解冻。
2.按下列热循环程序进行反应,以便cDNA合成之后立刻进行PCR扩增。
cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min
变性: 1 cycle: 94°C for 2 min
PCR 扩增: 40 cycles:
94°C for 15 s
55-65°C for 30 s
68°C for 1 min/kb
3.用凝胶电泳检测RT-PCR扩增产物。
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