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常规质粒提取系列
质粒小量提取试剂盒
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产品名称:
质粒小量提取试剂盒
产品型号:
PD1211-03
产品品牌: Biomiga
产品价格:
0.00 元
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简单介绍
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒采用离心柱高效专一吸附质粒DNA技术,操作简单快速,可从1~5mL**培养液中纯化提取10~30ug高纯度质粒DNA。
质粒小量提取试剂盒
的详细介绍
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒从1~5mL **培养液中纯化提取10~30 ug 高纯度质粒DNA。
质粒小量提取
试剂盒组成:
Catalog#
PD1211-02
Preps
100
ezBind Columns
100
Buffer A1
28 mL
Buffer B1
28 mL
Buffer N1
40 mL
Buffer KB
55 mL
DNA Wash Buffer*
22 mL
Elution Buffer
30 mL
RNase A (20 mg/mL)
2.8 mg
(140 µL)
User Manual
1
保存条件:
RNAse A在4℃下可以保存一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它组分室温保存。
注意事项:
1、使用前请将适量乙醇加入DNA Wash Buffer,令乙醇终浓度为80%;
2、纯化中低拷贝的质粒时,使用2倍的菌液体积,2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer;
3、若为-70℃甘油冻存的菌,请先涂布平板培养后,再重新挑选新的单个菌落进行培养。
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒操作简要步骤:
1、接种新鲜的单个菌落到1-4 mL的LB培养基(含适量***),37
o
C震荡培养14-16小时。室温下10,000 x g离心1分钟,收集菌体,并尽可能的吸去上清。
2、加入250 µL Buffer A1(确保已加入RNase A),用移液枪或涡流震荡充分悬浮**细胞。
3、加入 250 µL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀,然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。
4、加入350 µL Buffer N1, 立即反转多次,至溶液充分混匀,此时出现白色絮状沉淀。
5、室温下13,000 rpm离心10分钟(若上清中有白色沉淀,可再次离心)。
6、小心吸取离心后的上清液至带有收集管的DNA柱中(避免吸起沉淀),室温下13,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将离心柱重新放回到收集管中。
7、可选: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室温下13,000 rpm 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将离心柱重新放回到收集管中。
8、向离心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer(确保已加入无水乙醇),室温下,13,000 rpm 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将离心柱重新放回到收集管中。重复步骤“8”。
9、将离心柱放回高速离心机中,13,000 rpm室温下开盖离心2分钟,以彻底去除残留的乙醇。
10、将离心柱转至一个新的1.5 mL离心管中,向DNA柱的正中间加入50~100 µL(体积>50 µL)的ddH
2
O(pH在7.0-8.5之间)或Elution Buffer,室温放置2分钟,13,000 rpm 离心1分钟,洗脱质粒DNA。将洗脱液再加入到柱中,在13,000 rpm 离心1分钟,收集洗脱液。
Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒操作流程:
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产品目录
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无酶无热源塑料试剂瓶
无菌无热源诊断试剂瓶
化学塑料试剂瓶
实验室耗材
科学仪器
移液器与瓶口分液器
常用生化试剂
活体成像用试剂
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