质粒小量提取试剂盒

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产品名称: 质粒小量提取试剂盒

产品型号: PD1211-01

产品品牌: Biomiga

产品价格: 315.00 元

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简单介绍

Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒采用离心柱高效专一吸附质粒DNA技术，操作简单快速，处理1~5 mL的菌液，可获得10~30 µg的质粒DNA。

质粒小量提取试剂盒 的详细介绍

Plasmid Miniprep Kit I质粒小量提取试剂盒从1~5mL **培养液中纯化提取10~30 ug 高纯度质粒DNA。

试剂盒组分：

Catalog#	PD1211-01
Preps	50
ezBind Columns	50
Buffer A1	15 mL
Buffer B1	15 mL
Buffer N1	20 mL
Buffer KB	30 mL
DNA Wash Buffer*	15 mL
Elution Buffer	10 mL
RNase A (20 mg/mL)	1.5 mg(75 µL)
User Manual	1

保存条件：
RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它组分室温保存。

注意事项：
1、使用前请将适量乙醇加入DNA Wash Buffer，令乙醇终浓度为80%；
2、纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer；
3、若为-70^oC甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。

质粒小量提取试剂盒操作简要步骤：
1、接种新鲜的单个菌落到1-4 mL的LB培养基（含适量***），37oC震荡培养14-16小时。室温下10,000 x g离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。

2、加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮**细胞。

3、加入 250 µL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀，然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。

4、加入350 µL Buffer N1, 立即反转多次，至溶液充分混匀，此时出现白色絮状沉淀。

5、室温下13,000 rpm离心10分钟（若上清中有白色沉淀，可再次离心）。

6、小心吸取离心后的上清液至带有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀），室温下13,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。

7、可选: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室温下13,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。

8、向离心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer（确保已加入无水乙醇），室温下，13,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。重复步骤“8”。

9、将离心柱放回高速离心机中，13,000 rpm室温下开盖离心2分钟，以彻底去除残留的乙醇。

10、将离心柱转至一个新的1.5 mL离心管中，向DNA柱的正中间加入50~100 µL（体积>50 µL）的ddH2O（pH在7.0-8.5之间）或Elution Buffer，室温放置2分钟，13,000 rpm 离心1分钟，洗脱质粒DNA。将洗脱液再加入到柱中，在13,000 rpm 离心1分钟，收集洗脱液。

质粒小量提取试剂盒操作流程：

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