Bradford蛋白定量试剂盒

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产品名称: Bradford蛋白定量试剂盒

产品型号: 编号: PW0103

产品品牌: Biomiga

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简单介绍

· 使用本产品反应迅速，颜色产物 1 小时内保持稳定。 · 较普通的考马斯亮蓝染色法具有更大的线性范围和较小的变异系数。 · 灵敏度范围为 100-1500 μg/mL。 · 适用于多种缓冲液系统，干扰物质较少。

Bradford蛋白定量试剂盒 的详细介绍

说明 :

产品简介

Bradford 法是*简单和快速的比色蛋白定量方法。这一方法基于考马斯亮蓝 G-250与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595 nm处有*大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测 595 nm 的光吸收值的大小计算蛋白的含量。本产品将传Bradford 方法进行了改良，*大限度的加大蛋白定量的线性范围，变异性小于普通考马斯亮蓝染色法，灵敏度范围为 100-1500 μg/mL。

产品特点

· 使用本产品反应迅速，颜色产物 1 小时内保持稳定。

· 较普通的考马斯亮蓝染色法具有更大的线性范围和较小的变异系数。

· 灵敏度范围为 100-1500 μg/mL。

· 适用于多种缓冲液系统，干扰物质较少。

产品组分

组分	规格
Bradford 染色液	4 × 50 mL
BSA标准液(1 mg/mL)	2 × 1 mL

保存条件

BSA标准液保存在-20°C。2-8°C稳定保存一年。

操作步骤

（比色皿法）

1. 标准曲线的制备：

按下表操作，在试管中分别加入 0、20、40、80、100 μg蛋白标准溶液，用蒸馏水补足到 100 μL，加入 3 mL 的染色液，混匀后室温放置 10 分钟。

编号	1	2	3	4	5	6
蛋白标准(mL)	0	0.02	0.04	0.06	0.08	0.10
蒸馏水(mL)	0.10	0.08	0.06	0.04	0.02	0
染色液(mL)	3	3	3	3	3	3

在 595 nm 波长比色，读出吸光度，以各管的标准蛋白浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标绘出标准曲线。

2. 将适当体积样品（一般为 30 μL）加入到试管中，用蒸馏水补足到 100 μL。

3. 向各试管中加入3mL Bradford 染色液，室温放置 10分钟。

4. 用分光光度计测定 595 nm 处的吸光值。

5. 参照标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。

注意事项

1. 常用试剂的干扰：有些常用试剂在测定中会受到不同程度的干扰。Tris、巯基乙醇、蔗糖、甘油、EDTA 及少量去垢剂有较少影响，而 1%SDS、1% Triton X-100 及 1%Hemosol 的干扰严重。

2. 显色结果受时间与温度影响较大，须注意保证样品与标准的测定控制在同一条件下进行。

3. 考马氏亮蓝 G-250染色能力很强，特别要注意比色杯的清洗。颜色的吸附对本次测定影响很大。可将测量杯在无水乙醇中浸泡数小时，再冲洗干净即可。

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