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Biozol RNA 提取系统
Biozol RNA 提取试剂
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如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
Biozol RNA 提取试剂
产品型号:
规格: 100 mL 规格: 100 mL*5
产品品牌: Biomiga
产品价格:
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简单介绍
概述 :Biozol RNA 提取试剂 编号: R1020-01 编号: R1020-02
Biozol RNA 提取试剂
的详细介绍
产品简介
Biozol 可从各种真核培养细胞,动物组织,**植物和**中快速高效提取总RNA,整个实验可控制在30分钟内。通常情况下可单次处理1 x 10
6
个真核细胞,1 x 10
9
个**细胞,100 mg 动物或植物组织。如果你要进行全血RNA提取的话,可以使用本试剂盒,不过我们建议使用Ezgene
TM
Blood RNA Kit (product # R6411)这个专门设计来用于全血RNA提取的试剂盒,Ezgene
TM
Blood RNA Kit可以很好的溶血,并去除血红素,提高RNA的得率。
本试剂盒纯化的RNA可用于RT-PCR, Northern 杂交,mRNA纯化,体外翻译等下游实验。
原理
细胞或组织经Biozol裂解,试剂中的成分会抑制RNase活性。加入氯仿抽提,裂解液将分为水相和有机相。RNA存在于水相中,用异丙醇处理水相后,经过75%酒精的洗涤,室温晾干或真空干燥后用DEPC水洗脱就能得到高质量的RNA。
贮存条件及其稳定性
Biozol 试剂保存于4℃。该产品可保证在购买之日起至少24 个月內有效。
产品组分
Catalog #
R1020-00
R1020-01
R1020-02
Biozol 溶液
10mL
100 mL
100 mL x 5
说明书
1
1
1
注:Biozol 溶液包含异硫氰酸胍和苯酚,实验时请格外小心。
即日起为方便客户使用,Biozol溶液改为红色。
RNA
提取操作步骤
真核细胞和组织
RNA
提取步骤
1.
用
1 mL Biozol
试剂
裂解细胞或组织
1 mL Biozol
溶液
可以充分裂解
10
7
个细胞
,或是
100mg
剪碎的组织(30 mm
3
)
对于单层培养细胞(成纤维细胞,内皮细胞等)
按下面的方法在培养瓶中直接裂解细胞:尽量吸干培养基,然后直接将Biozol 溶液加入到培养皿。用裂解液吸打培养皿上面的细胞,使全部细胞都裂解。转移裂解液到1.5mL的离心管。(这个办法比用胰酶消化收集细胞好一些,因为这样可以*大限度降低RNA酶对RNA的降解。)
对于悬浮培养细胞
用不超过1,500 rpm (400 x g) 离心 5分钟.弃上清,加入
Biozol
溶液
,漩涡混匀或枪头吸打混匀。然后转移到1.5mL离心管。
对于组织样品
按照样品的类型,选择一个较好的匀浆方法。除了液氮研磨以外,其他匀浆方法可直接在
Biozol
溶液
中操作。其中对于特殊组织样品如:肝、脾、骨及软骨等需要将Biozol用量加大一倍或是降低样品量。
2. 在室温下,静置两分钟。
3. 每
1 mL
Biozol
溶液
加入
0.2
倍体积
的氯仿(1 mL Biozol Reagent 对应加入0.2 mL 氯仿),盖好盖,用手剧烈震荡15秒。
4. 4
o
C 下12,000 xg 离心 3 分钟。溶液分为酚氯仿相、中间相和上层水相。RNA溶解在水相中。
5. 转移不超过80%的水相到一个干净的离心管,然后加入
0.5
倍体积
的
异丙醇
(96-100%,室温),漩涡充分震荡15秒。
6. 4
o
C 下12,000 x g 离心 10 分钟,离心后试管底部将出现沉淀。
7. RNA沉淀的清洗:沿管壁轻轻加入
1mL
75%
的乙醇
(防止加入乙醇时冲散沉淀),用手轻轻震荡离心管洗涤沉淀。7500×g离心5分钟,弃上清,尽量去除残留乙醇,这样可以减少盐离子污染。
8. 重复第7步。
9. RNA的溶解:室温晾干或真空干燥,(不要过于干燥,否则RNA很难溶解)然后加入
30-50 µL
DEPC
水
溶解RNA,待沉淀完全溶解后于-80℃保存。
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