无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6

点击看大图

如果您对该产品感兴趣的话,可以

产品名称: 无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6

产品型号: PD1622-01

产品品牌: Biomiga

产品价格: 0.00 元

折扣价格: 0.00 元

产品文档: 无相关文档

简单介绍

无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6（EndoFree Plasmid ezFlow ezFilter Mega6 Kit）处理500-1500mL的菌液，可获得6mg的质粒DNA。

无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6 的详细介绍

无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6（EndoFree Plasmid ezFlow ezFilter Mega6 Kit）处理500-1500mL的菌液，可获得6mg的质粒DNA。

无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6组分：

Catalog#	PD1622-01
Preps	2
DNA Unit	2
Filter Unit	2
Replacement Cup	4
Buffer A1	130 mL
Buffer B1	130 mL
Buffer N3	35 mL
Buffer KB	110 mL
Buffer RET	260 mL
RNase A(20 mg/mL)	12.5 mg(625 µL)
Endofree Elution Buffer	60 mL
User Manual	1

保存条件：

RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它组分室温保存。

注意事项：

1、质粒拷贝数：纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇，相同体积的Wash Buffer (70% 乙醇)和Endofree Elution Buffer.
2、转化菌: 若为-70℃甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。
3、切勿直接取冻存在4℃的菌进行培养。
4、杯结合能力：6 mg

无内**快速质粒超大量提取试剂盒Mega6操作简明步骤：
1、取500 µL新鲜的菌液接种到 800-1,000 mL (勿超过 500 mL)的LB培养基（含适量***），37^oC震荡培养14-16小时。室温下5,000 x g离心10分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
2、加入60 mL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液器或涡流震荡确保**沉淀重新悬浮。
3、加入 60 mL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀，然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。
4、加入15 ml Buffer N3, 立即反转几次至出现絮状白色沉淀。涡漩震荡10 秒。充分混匀后，溶液将会变的颜色均一，如果此时溶液颜色不均一，均局部颜色过深，建议将溶液轻甩几次，以充分混合溶液，
5、将双层Filter unit与500 mL或1000 mL的**瓶(Corning# 430518 or 430282 or equivalent) 连接，旋紧，再将此装置与真空负压装置连接。
6、先将步骤“5”中底部较澄清的裂解产物转移至双层Filter unit中，静置5分钟后打开真空装置，使负压由低到高，5分钟后增至*大（0.04 Mpa）
7、当大部分裂解液已被过滤时，关掉真空负压装置，等候1分种，拆卸装置，移去双层Filter unit。
8、再将DNA unit杯与一个新的**的500 mL或1000 mL的**螺口标准瓶连接，旋紧。并将过滤嘴与真空负压装置连接。在步骤“7”中收集到的裂解液中加入1倍体积的Buffer RET (如120 mLBuffer RET加入120 mL的上清液中), 60 mL100%乙醇，立即混合均匀，立即将一半倒入DNA unit杯中，开启负压装置，进行过滤吸附操作。
9、再将剩下一半倒入DNA unit杯中，当所有裂解液已过滤完，再维持真空1分钟后，关掉负压装置。
10、向DNA Unit杯中加入50 mL Buffer KB，*大负压（0.04Mpa）1分钟，使液体完全通过DNA Unit 杯。
11、在DNA Unit杯中加入50 mL 70%乙醇，*大负压（0.04 Mpa）1分钟，使乙醇完全通过DNA Unit杯。重复此操作步骤一次。
12、在DNA Unit杯中加入60 mL无水乙醇，*大负压1分钟，关掉负压装置，倒掉瓶子中的废液，将DNA Unit杯重新连接至标准瓶上，开启负压装置至*大负压，真空抽20分钟，以充分去除残留的乙醇。
13、关掉负压装置，静置一分钟，移去标准瓶，将DNA Unit 连接至一个新的50 mL的离心管中，并旋紧。
14、加入10 mL Endofree Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上，室温放置2分钟，打开负压装置至*大（0.04 Mpa）洗脱DNA。此时会收集到3~5 mＬ洗脱液，这是1^st洗脱液。
15、关掉负压装置，将DNA Unit连接至一个新的50mL的离心管中，加入8 mL Endofree Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上，室温静置2分钟，开启负压装置至*大（0.04 Mpa）洗脱DNA。此时会收集到约3-6 mL洗脱液，这是2^nd洗脱液。

无内**质粒超大量提取试剂盒Mega6操作流程：

产品留言

标题

联系人

联系电话

内容

验证码

点击换一张

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!