含磺酰氯基团的荧光试剂(专标氨基)
磺酰氯(SC)具有很高的反应活性,在水中不稳定特别是pH高的情况下。它除了与氨基反应形成磺胺键外,还与羟基,苯酚,巯基和咪唑基团反应。Dye-SC与生物分子连接须考虑以下因素的影响。
1. 溶剂:大多数情况下,应该溶解在无水DMF中,不能使用DMSO,因为它在DMSO中不稳定。
2. 反应 pH:Dye-SC与非质子化的脂肪胺的反应受pH影响较大,一般反应pH>9.0。蛋白的修饰通常在pH 9.0~10.0进行。
3. 反应缓冲溶液:不能使用含有自由氨基的缓冲溶液。铵盐(例如硫酸铵和醋酸铵等常用的蛋白沉淀剂例如runngngrongye)在标记前也必须除去。
4. 反应温度:一般在常温或4℃进行标记反应。
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