Endoclean Buffer

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产品名称: Endoclean Buffer

产品型号: 10mL 50mL

产品品牌: Biomiga

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简单介绍

编号: RPECB-01 规格: 10mL 编号: RPECB-02 规格: 50mL

Endoclean Buffer 的详细介绍

说明 :

产品说明：

经常规质粒制备方法制备的质粒DNA，通常含有高水平的内**（LPS，脂多糖）。如果制备的质粒用于转染内**敏感型细胞系，或者用于微注射，通常需要对纯化到的质粒进行内**去除操作，以降低内**水平。本公司生产的内**去除溶液，可以简单高效的对纯化到的质粒进行去除内**操作，经过一次处理，可以使内**水平降至0.1U/ug DNA，两次处理可使内**水平小于0.1 U/ug DNA。

保存条件和稳定性

自购买之日起，本试剂可在室温条件下（15℃~25℃）保存18个月。

重要提示

Ø 本试剂为红色溶液，较为粘稠，使用时，请用剪去枪头尖的枪头吸取。

Ø 实验前，请先将水浴锅调至65度。

内**去除操作步骤

1. 在制备好的质粒中加入0.1倍体积的Endoclean Buffer，如10 mL质粒中加入1mL EndoClean Buffer。

注意：如果起始的质粒量很少，为减少损失，可以适当的增加质粒的体积。

2. 颠倒充分混匀，冰上放置10分钟。

注意：低温下，溶液中内**将会被吸附，冰浴步骤非常重要，此时溶液将会变澄清。

3. 将混合物置于65度水浴中水浴5分钟，此时溶液将会变混浊，室温下，12，000 rpm离心5分钟，此时溶液将会分层。

注意：水浴后立即进行离心操作，高温将有利于溶液离心后分层，禁止低温离心操作；如果温度较低，离心后不分层，加入1/25 体积的氯仿，混匀后，再次进行离心操作。

4. 小心吸取上清，避免吸起下层液体，转移上清至一个新的离心管中，加入0.1 倍体积醋酸钠或醋酸钾（3M，PH 5.2）和0.7倍体积的异丙醇，沉淀质粒DNA。

5. 12，000rpm离心5分钟，吸去上清，加入1~5mL 70%的乙醇，12，000 rpm 离心5分钟，弃去上清液。

6. 瞬时离心，尽量吸干残留的上清液，空气干燥20分钟，或50烘箱中干燥10分钟，加入适当的无内毒水溶解质粒DNA。

经过一次处理的质粒DNA内**含量小于0.1U/ug DNA，如果想得到内**含量更小的质粒，请重复步骤1~6。

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