Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield )

应用
普通PCR、高保真PCR、复杂DNA 片段PCR、高GC含量模板PCR、平末端载体构建PCR、菌落PCR、定点突变PCR。

质量控制
■ 内切核酸酶检测：无可检测水平的内切核酸酶污染；
■ 热稳定性：37℃保持21 天酶活性无明显降低。

浓度
2 U/μL，100 U/管

来源
E.coli 表达重组Pyrococcus furiosus DNA 聚合酶基因。

储存条件
保存（运输）温度：-20℃

活性单位定义
1 个活性单位定义为70℃反应30 min，将10 nmol dNTPs合成多聚核苷酸（吸附于吸附柱DE-81）所需的酶量。
酶活性分析混合物：67 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl₂, 1 mM 2-
巯基乙醇, 50 mM NaCl, 0.1 mg/mL BSA, 0.75 mM 活化鲑精DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/mL [³H]-dTTP。

抑制和失活
■ 低浓度尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺和DMSO 对Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性无明显抑制作用；
■ 离子型去污剂脱氧胆酸钠(>0.06%)、十二烷基肌氨酸钠（>0.02%）、SDS(>0.01%)， 非离子型去污剂Tween20(>5%)、 Nonidet-P40 (>5%)、 Triton X-100 (>5% ) 对Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性具有抑制效果；
■ 酚/ 氯仿抽提可使Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 失活。

储存缓冲液
Storage Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA,1 mM
dTT, 0.5%(v/v) Nonidet-P40, 0.5%(v/v) Tween-20, 50%(v/v)
Glycerol。
10×Platinum HiProof Taq PCR Buffer ( without Mg²⁺)
200 mM Tris-HCl (pH 8.8), 100 mM (NH₄)₂SO₄, 100 mM KCl,
1 mg/mL BSA, 1% (v/v) TritonX-100。

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