产品特性
1.热稳定性:94℃热处理12小时后,仍有50%的活性。 2. 高盐离子耐受性:相对其它酶,UltraProof对盐离子浓度有更高、更广泛的耐受性,Mg2+浓度耐受范围为1.0~6.0 mM,K+浓度可耐受至150mM,因此可以直接以血液等成分复杂的样品为模板进行PCR扩增。 3. 扩增能力:以λDNA为模板,可扩增10kb λDNA, 对PCR扩展程序进行优化后,可有效扩增18kb λDNA的长片段;在配合使用5×GC Buffer I或Buffer II的情况下UltraProof能有效扩增GC含量高达85%的DNA模板。 4. 外切酶活性:具有极高的3'→5'外切酶(校正)活性,无可检测水平的5'→3'外切酶(水解)活性。 5. 超高保真性:UltraProof具有3'→5'外切核酸(校正)活性和外加结构域,使其具有极高保真度,其保真度大约是普通Standard Taq 的15倍以上。
应用范围
适用于超高保真PCR、定点突变PCR、高GC含量模板PCR、长片段扩展PCR、复杂模板的扩增、PCR检测试剂盒、平末端载体构建PCR、血液PCR、快速PCR等。
高GC含量DNA片段扩增实例
图1 以质粒为模板,待扩增DNA片段HCN4(NM_005477.2, 1095-1534) 中GC含量80.23%,大小为440 bp。
人全血模板扩增实例
图2 检测结果表明, UltraProof DNA聚合酶能直接扩增浓度低至1%和高达35%的人全血模板。
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